陸時羨聞言一笑,透露出一絲神秘的氣息:“說出來就沒意思了,你們可以猜猜看。”


    幾人你看看我,我看看你,眼中都是好奇和探究。


    對他話裏的真實性倒是一點沒有懷疑。


    因為他們對陸時羨的信任,早已經在長時間的相處中得到了多次驗證。


    時間緊急,任務繁重。


    幾個人心裏都清楚接下來的時間可能不會輕鬆了。


    但也都做好了苦戰得心理準備。


    做科研不耐得了寂寞是不行的。


    不過陸時羨發現一向顯得理智的梅林此時居然顯得有些亢奮。


    他好笑地搖搖頭,忽然想到一句話:“如果沒有旺盛的好奇心和純粹的求知欲為動力,就不可能產生那些對人類和社會具有巨大價值的發明創造。”


    在這個角度上,他認為梅林和他是一路人。


    沒有多餘的寒暄,也沒有多餘的解釋。


    四人默契地迴到實驗室。


    陸時羨站在操作台前直入主題。


    “接下來,可能大家要辛苦一點,將所有測序的準備工作做好,然後所有的測序流程由我來操作。”


    “梅林、瑟琳和鮑勃你們分別負責dna提取、文庫構建和引物連接的預處理操作。”


    “這個工作結束之後,你們可以看我的操作,有什麽不懂的都可以問我。”


    聞言,三人皆是點頭,沒有異議。


    這個安排和他們預想的差不太多。


    隻不過就是測序儀隻有一台,又隻有陸時羨一個人操作。


    相較於預處理,陸時羨的工作就顯得更繁複。


    三代測序技術其實也就是單分子測序技術,它能夠直接讀取單dna分子的序列信息,從而規避掉pcr擴增和文庫擴增帶來的風險。


    但沒有完美的技術,這項技術區別於高通量測序技術的缺點是測序信息量大且非常複雜,在測序過程中對精力的消耗是很大的。


    三人仿佛已經看見陸時羨即將爆肝的樣子,心中都是對他發際線的憐憫。


    但他們對陸時羨的想法一無所知。


    接下來,幾人都陷入了緊張而有序的忙碌之中。


    預處理看似隻是測序的基礎,但也不是隨便來個人就能做的。


    他們這台測序儀運用的是smrt測序技術,它是利用dna多聚酶在放射線觀測下合成dna,從而觀察到dna的添加情況,以此得到dna的序列信息。


    文庫製備是預處理工作中最複雜的一環,需要對基因組的dna進行片段化的末端修複。


    這個操作類似於進行最精密的手術,需要將發夾式的接頭連接到雙鏈dna分子兩端,然後形成一個封閉的圓圈。


    再將引物和聚合酶退火到接頭上,最後就能形成一個啞鈴狀的待測序文庫。


    光是這個流程就耽誤了三四天的時間。


    三個人經過現學,然後依次進行了操作。


    最後的結果讓陸時羨很是意外。


    在這種精細實驗操作上,鮑勃的表現居然比作為女生的瑟琳還要好。


    綜合製備時間和效果,他得到的文庫經過查驗之後標準程度比較高。


    雖然和陸時羨親手製備的還比不了,但用來進行測序已經是基本滿足要求了。


    看著幾人都是詫異地望著自己,鮑勃雖然也很意外,但在臉上毫無顯現,然後驕傲地抬起頭。


    “看什麽?”


    “難道不允許我偷偷努力,然後驚豔所有人嗎?”


    不過,都是朝夕相處的隊友,彼此什麽習慣和水平都清楚。


    估計是瞎貓碰上死耗子,但梅林和瑟琳沒好意思去打擊他。


    “我假裝信了。”陸時羨嘴上說著,心中還是比較開心的。


    一個團隊如果一直隻靠固定的那麽幾個人,是不會存在太久的。


    一個人的精力和時間是有限的,而探索無邊宇宙和世界奧秘的事業卻是無限的。


    這也就注定單打獨鬥是走不遠的。


    有人能夠站出來,分擔一下他的壓力,陸時羨感到有些欣慰。


    “很好,那麽文庫製備這塊工作就由鮑勃來負責,梅林你和瑟琳在完成其他步驟之後進行協助就好了。”


    接下來的幾天,經過不斷的磨合。


    這個四人小團隊才逐漸走入了正軌。


    沒辦法,和陸時羨這種以前熟練掌握過的不一樣,在這項技術上,三人幾乎是從頭開始學習。


    而且就這還隻是前置準備工作,就幾乎花費了一個星期的時間。


    “你們之前已經知道在片段化操作中,這個過程是隨機的,因此可能會出現平齊的末端,也有可能出現不平的末端,因此要進行末端修複,將產生的所有的3''或5''突出黏性末端轉化成平末端。”陸時羨正解答著來自鮑勃的問題,


    經過對新技術的不斷上手操作,再結合他以前的實驗經曆,彼此碰撞之下,鮑勃產生了一些疑惑。


    他的問題是:“末端修複加a堿基很好理解,是為了產生粘性末端,但進行接頭連接全過程都要用到t4 dna聚合酶,讓他有些不解。


    這個問題比較基礎,隻能說鮑勃之前沒有留意聚合酶的各種作用。


    但陸時羨也沒不耐煩,認真的迴答道:“那是因為t4 dna聚合酶全程都在起作用,它的原理是不僅能夠從 5''至3''方向催化合成 dna,補平5''突出末端,也具有3''至5''外切酶活性,幫助對3''突出末端進行切平,最後將黏性末端dna片段轉變為平末端dna。”


    緊接著,梅林也貢獻了一個問題。


    他頗為疑惑地問道:“我們的樣本裏麵含有的rna中最多的是rrna,如果直接對最後得到的rna文庫進行測序,那麽數據裏麵可能會存在rrna的測序數據,這個數據我怕會有一些誤差啊?”


    陸時羨不斷在心中點頭。


    梅林能想到這一點,足以見到他思維的連貫性。


    沒辦法,這個問題確實問的很關鍵,幾乎決定了測序工作成功與否。


    而他之前都沒有主動提及這一環,是想著自己親自上手處理時候在說一下的。


    但現在既然有人說到這,提前一下也不是不行。


    事實上,梅林的判斷還是有些保守了。

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